QPCR具体步骤

一、配引物：

将引物离心，每管加25 ul（根据引物说明） DEPC水，涡旋、瞬离后，取10 ul至新的无菌无酶的1.5 ml EP管中加90 ul DEPC水稀释10倍即工作液浓度。

二、稀释样本：

用DEPC水，将反转录的样本稀释十倍（20 ul样本+180 ul DEPC水）。

三、配Mix（避光）：

                    SYBR   ：5 ul

Mix   引物X-F ：0.2 ul   ×样本数×3（复孔）

引物X-R ：0.2 ul

四、加样：

取QPCR孔板至冰盒上，每孔加5.4 ul Mix+4.6 ul 样本，透明膜覆盖后上机。

上机：