早期肠内营养通过减少外科危重病人中性粒细胞胞外陷阱的形成来保护肠屏障功能

本文以《Early Enteral Nutrition Preserves Intestinal BarrierFunction through Reducing the Formation of NeutrophilExtracellular Traps (NETs) in Critically Ill Surgical Patients》为题，第一作者为胡琼源。

背景：

肠道被认为是导致严重疾病和器官损伤的原因。最近，中性粒细胞细胞外陷阱(NETs)的过度形成与粘膜炎症有关。对肠粘膜的直接研究对于阐明危重患者肠屏障的潜在机制至关重要。我们假设早期肠内营养(EN)可以减少肠网并维持肠屏障。

方法：

使用活检钳对患有肠外瘘的外科危重患者进行肠活检。评估紧密连接蛋白、粘膜炎症和细胞凋亡的表达。此外，通过蛋白质印迹和免疫荧光分析评估患者肠道标本中的净相关蛋白。

图1：危重病早期肠内营养对黏膜形态的影响。外科危重病人的腹部表现和瘘管造影。(b)接受不同类型营养的危重病患者肠道组织学的H&E染色。

图2：早期肠内营养改善肠道的免疫环境。代表性的免疫组织化学图像显示了危重病期间肠道样本中的炎症因子白介素-1β、白介素-6、肿瘤坏死因子-α和白介素-10。

图3：早期肠内营养对肠道机械屏障的影响。比较全胃肠外营养组和早期肠内营养组，危重患者肠粘膜内紧密连接蛋白的位置和表达。(b)使用蛋白质印迹法测定ZO-1、occludin和claudin-1的蛋白质水平。

图4：早期营养对肠道细胞凋亡的影响。(a)危重患者肠道中TUNEL染色的代表性图像。(b)显示危重患者肠道样本中Bax和Bcl-2表达的代表性免疫组织化学图像。(c)通过蛋白质印迹法测定Bax和Bcl-2的表达。以GAPDH为对照。

图5：早期肠内营养可减少肠道内 NET 的存在。 (a) 双免疫荧光染色的代表性图像危重患者肠道样本中瓜氨酸组蛋白 H3（citH3，绿色）和髓过氧化物酶（MPO，红色）。 (b) 双倍中性粒细胞弹性蛋白酶（NE，绿色）和髓过氧化物酶（MPO，红色）的免疫荧光染色。 citH3 和 MPO 的共定位或NE 和 MPO 表示 NET 结构。

结果：

在接受早期全胃肠外营养(TPN)的危重患者中，肠屏障显著受损，表现为肠绒毛萎缩、炎症浸润、肠细胞凋亡增加和TJ表达异常。早期肠内营养显著减轻了这些肠道损伤。此外，我们观察到重症外科患者肠道中网状结构的形成增加和网状相关蛋白的表达升高。早期肠易激综合征与神经网络的减少和神经网络相关蛋白的表达减少有关。机械方面，对TLR4途径的分析显示，与接受早期肠内营养的患者相比，接受全胃肠外营养的患者TLR4、核因子κB和MAPK信号显著增加。结语。严重疾病期间，人体肠道的肠道屏障被破坏。我们的数据表明，在危重外科患者的肠道中显示出净结构的增加，早期肠内营养治疗与净形成的减少和粘膜免疫的保持有关。